一.儀器
液相色譜儀,紫外檢測器;離心機(jī);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀;K-D濃縮器。
二.試劑
激素標(biāo)準(zhǔn)貯備液:分別稱取雌三醇、雌二醇、雌酮、睪酮、孕酮0.1000g,用甲醇溶解并定容至100mL,每毫升含各種激素均為1.000mg。
激素標(biāo)準(zhǔn)使用液:精密吸取一定量的激素標(biāo)準(zhǔn)品和內(nèi)標(biāo)貯備液,用甲醇配制成每毫升含各種激素為10.00μg、an眠酮2.00μg和每毫升含各種激素2.00μg、an眠酮2.00μg的兩種標(biāo)準(zhǔn)使用液。
三.實(shí)驗(yàn)步驟
1.樣品的處理
取可食部分,搗成均漿,稱取50g左右置250mL具塞三角瓶中。在上述樣品中加入an眠酮20.00μg/mL的內(nèi)標(biāo)貯備液1.0mL,加甲醇+丙酮(1+1)混合溶液150mL,在振蕩器上振搖提取30min。用快速濾紙過濾,殘?jiān)蒙倭考状?丙酮(1+1)混合液洗滌數(shù)次,洗液并入濾液中,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀或K-D濃縮器中將溶劑蒸除。殘?jiān)眉状?0mL溶解,經(jīng)盛有無水硫酸鈉的漏斗濾入250mL分液漏斗中,再用10mL甲醇分?jǐn)?shù)次洗滌漏斗及內(nèi)容物,洗液并入濾液中,加pH=5.2的醋酸鈉緩沖液80mL左右,混勻后二氯甲烷50mL、30mL、30mL振搖提取3次。合并提取液并用無水硫酸鈉脫水,在水浴上揮干溶劑,殘?jiān)眉状既芙獠⒍ㄈ葜?0.0mL,混勻后,以3000r/min速度離心5min,取上清液供色譜分析用。
2.液相色譜參考條件
① 色譜柱:HP-ODS 4.6mm×200mm。
② 流動相:乙腈+甲醇+四氫呋喃+0.01mol/L 醋酸鈉溶液(20+20+10+50)。
③ 流速:1.0mL/min。
④ 測定波長:270nm。
⑤ 進(jìn)樣體積:10μL。
3.樣品測定
取供色譜測定的樣品溶液10μL,注入液相色譜儀,以內(nèi)標(biāo)法定量。
傳真:0531-69980259
地址:濟(jì)南市槐蔭區(qū)經(jīng)一路333號保利中心商業(yè)樓
濟(jì)南精測電子科技有限公司(www.ludaofeng.com.cn)版權(quán)所有 © 2024 備案號:魯ICP備16007636號-3 管理登陸 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) GoogleSitemap